Aicone Biochip
Primeiro Teste de anticorpos COVID-19 totalmente quantitativo do mundo – Tipos e classe/subclasse Ig (IgG, IgA, IgM; IgG1-4)
Introdução
Aicone Biochip é um teste de serologia COVID-19 multiantigénico, multi-domínio, totalmente quantitativo.
Aicone Biochip permite a determinação dos epitopos alvo, títulos e classe/subclasse Ig (IgG, IgA, IgM; IgG1-4) de anticorpos produzidos em todas as fases da infecção por COVID-19, desde a exposição inicial, desenvolvimento da doença, pós-recuperação ou pós-vacinação. Estes resultados fornecerão conhecimentos críticos sobre se os indivíduos têm títulos elevados de anticorpos potencialmente neutralizantes contra a SARS-CoV-2 que podem proteger contra a reinfecção ou se são necessárias vacinações de reforço.
Até recentemente, não havia nenhum teste de anticorpos COVID-19 disponível para fornecer um resultado quantitativo. Isso mudou. O teste Aicone Biochip biochip baseia-se na relação diferencial entre classe/subclasses de Ig através dos 4 antigénios da SARS-CoV-2 para dar uma estimativa do estádio de infecção e imunidade de um indivíduo. Isto é inigualável em qualquer outro teste.
Aicone Biochip é um teste laboratorial de biochip que utiliza a tecnologia de dobragem de proteínas patenteada pela A Aicone-Protein Array assegurando que os antigénios virais são dobrados corretamente, preservando todos os sítios locais de ligação de anticorpos conformacionais e lineares. Aicone-Protein Array que é utilizado pelas principais entidades farmacêuticas e de pesquisa para desenvolver vacinas e terapias, assegura que o teste identifica mais verdadeiros positivos e menos falsos negativos.
A reatividade cruzada entre regiões imunogênicas do SARS-CoV-2 e outros coronavírus pode levar a uma sobre estimação da sero-prevalência numa dada população. Aicone Biochip foi concebido para reduzir a reatividade cruzada, visando múltiplos domínios específicos do SARS-CoV-2, resultando em menos falsos positivos, e numa determinação mais precisa da sero-prevalência.
A gama de produtos Aicone Biochip é baseada no biochip. Todos eles incorporam múltiplos antígenos virais adicionais. São concebidos para pesquisa e ensaios clínicos de vacinação. Ver a Descrição do Produto para mais detalhes.
O conteúdo pode ser personalizado com base em requisitos individualizados para ensaios clínicos de vacinas ou estudos de pesquisa de soro-prevalência.
APLICAÇÕES-CHAVE
Aicone Biochip pode ser utilizado para testes clínicos de vacinas ou estudos de pesquisa de sero-prevalência.
Perfil de anticorpos da população para pesquisa da sero-prevalência
O epitópo alvo dos anticorpos produzidos após a infecção apresenta um nível significativo de diversidade entre uma população. Aicone Biochip fornece uma determinação mais precisa da sero-prevalência, visando mais de 10 domínios diferentes de proteínas SARS-CoV-2.
Determinar a qualidade e quantidade de proteção dos anticorpos produzidos
Alguns indivíduos produzem anticorpos que visam locais que são neutralizantes (protectores), enquanto outros produzem anticorpos não neutralizantes. Aicone Biochip pode ser utilizado para identificar indivíduos que têm títulos elevados de anticorpos potencialmente neutralizantes contra a SARS-CoV-2.
Permitir a avaliação quantitativa da resposta específica a antígenos individual em testes de vacinas
Como se mostra abaixo, os dados dos testes Aicone Biochip permitem inferir 3 conclusões principais:
1. Há uma grande variação nos títulos de anticorpos entre os indivíduos infectados com SARS-CoV-2
2. Há um elevado grau de variação nas respostas de anticorpos específicos dos doentes aos diferentes domínios das proteínas do SARS-CoV-2
3. Uma maior cobertura dos epítopos-alvo leva a uma maior sensibilidade e especificidade
Aicone Biochip GAMA DE PRODUTOS
Descrição do produto
39508H e 39508V têm 24 matrizes por lâmina, 39508R tem 8 matrizes por lâmina.
Especificação do produto
Biochip Layout
Sondas de Controlo
- Controlo positivo
-
- Cy3-BSA
- Cy5-BSA
- IgA (controle positivo para detecção de imunoglobulinas totais)
- IgG (controle positivo para detecção de IgG e imunoglobulinas totais)
- IgM (controle positivo para detecção de IgM e imunoglobulinas totais)
- Controle negativo
-
- IgA (controle negativo para detecção de IgG e IgM)
- IgG (controle negativo para detecção de IgM)
- IgM (controle negativo para detecção de IgG)
- Sonda de controle negativo para detecção de imunoglobulinas totais
Aicone Biochip ANTIGÊNEOS
Detalhes técnicos dos principais antígenos
Análises Western blot mostrando a expressão bem sucedida das proteínas CoV e Influenza usando Aicone-Protein Array:
VANTAGENS DE USAR AICONE-PROTEIN ARRAY
Aicone-Protein Array facilita a mensuração de anticorpos com sensibilidade e especificidade inigualáveis, o que o torna muito superior a outras plataformas de anticorpos. Como todas as proteínas das matrizes proteicas Aicone-Protein Array estão corretamente dobradas, os epítopos conformacionais e não conformacionais estão disponíveis para ligação a anticorpos. Como 90% dos locais de ligação de anticorpos são de natureza conformacional, se a proteína não for de comprimento total ou não estiver dobrada corretamente, outras matrizes proteicas na verdade levam à perda da ligação a esses epítopos conformacionais. Usando matrizes proteicas Aicone-Protein Array garante a ligação de anticorpos não apenas aos epítopos lineares e não conformacionais, mas também aos epítopos conformacionais descontínuos.
A principal vantagem da matriz baseada em Aicone-Protein Array é que a proteína imobilizada é dobrada em sua conformação nativa, devido à fusão do BCCP e à ausência de purificação física da proteína que pode afetar a exposição do epítopo para reconhecimento.
*90% dos anticorpos se ligam a epitopos conformacionais, referências:
- Barlow, D. J., Edwards, M. S., & Thornton, J. M. (1986). Continuous and discontinuous protein antigenic determinants. Nature, 322(6081), 747–748;
- Van Regenmortel, M. H. V. (2006, May). Immunoinformatics may lead to a reappraisal of the nature of B cell epitopes and of the feasibility of synthetic peptide vaccines. Journal of Molecular Recognition, 19(3), 183–187.
FATOR DE NECROSE TUMORAL (TNF) α – 1 antígeno
Interferões – Anticorpos antinucleares – Fator de Necrose Tumoral
Todas as proteínas, incluindo os controles, são fabricadas na mesma matriz em triplicata. Abaixo está a lista de proteínas na matriz COVID+ V2 de Aicone:
- Interferões (IFN) (-α, – γ, -ω) – 4 antígenos
- Anticorpos antinucleares (ANA) relacionados com antígenos – 4 antígenos
- Fator de Necrose Tumoral (TNF) α – 1 antígeno
- SARS-CoV-2 Antígeno Nucleocapsid – 6 domínios
- SARS-CoV-2 Antígeno Spike – 3 domínios, incluindo comprimento total
- Controles (Cy3-BSA, IgG x 2 diluições, IgA x 2 diluições, IgM x 2 diluições, BCCP, identificador poliespecífico x 2) – 10 componentes
IFNs e TNF foram adicionados ao chip para atuar como componentes para prever o curso e o resultado da doença através da medição da ligação direta de anticorpos. Além disso, a elevação de TNF-α e IL-6 no soro de pacientes com COVID-19 foi mostrada como um forte preditor da gravidade e sobrevivência da doença. As informações obtidas do chip sobre essas citocinas facilitarão uma estratégia potencial de mitigação no manejo da COVID-19.
O Fator de Necrose Tumoral TNF-α é uma citocina inflamatória produzida pelas células do sistema imunológico (macrófagos) durante a inflamação aguda. O papel principal desta citocina envolve a sinalização de “apoptose”, o que significa que a célula precisa ser destruída.
Os anticorpos antinucleares são autoanticorpos que se ligam ao conteúdo do núcleo da célula. Em indivíduos normais, o sistema imunológico produz anticorpos contra antígenos estranhos, mas não contra autoanticorpos humanos.
IFNγ, ou interferon tipo II, é uma citocina que é crítica para a imunidade inata e adaptativa contra infecções virais, algumas bacterianas e protozoárias. IFNγ é um importante ativador de macrófagos e indutor da expressão de moléculas do complexo de histocompatibilidade principal (MHC) Classe II. A expressão Aberrant IFNγ está associada a uma série de autoinflamatórios e auto-imunidiários.
IFNs e TNF foram adicionados ao chip para atuar como componentes para prever o curso e o resultado da doença em pessoas infectadas pela COVID-19 através da medição da ligação direta de anticorpos. O Biochip é capaz de quantificar a Resposta Imune. Todas as proteínas, incluindo os controles, são fabricadas na mesma matriz em triplicata.
PRECISÃO DEVIDO A AICONE-PROTEIN ARRAY
Os antígenos COVID-19 da AICONE são dobrados corretamente, preservando todos os locais de ligação de anticorpos conformacionais.
Aicone Biochip Alavancagens Aicone-Protein Array A única tecnologia de proteína dobrada corretamente do mundo
- Como se pensa que a maioria dos anticorpos reconhece epitopos descontínuos em suas proteínas-alvo, é fundamental que os antígenos usados em ensaios serológicos ou apresentados às células B para o desenvolvimento de vacinas baseadas em anticorpos estejam em uma forma nativa.
- O uso da tecnologia Aicone-Protein Array para a produção dos antígenos SARS-CoV-2 garantirá que esses antígenos sejam dobrados corretamente, preservando todos os locais de ligação de anticorpos conformacionais.
Química de Superfície de Aicone-Protein Array Matrizes Proteicas
- BCCP-tagged, biotinylated Aicone-Protein Array proteínas são imobilizadas em uma superfície de hidrogel revestida com estreptavidina personalizada.
- Aicone-Protein Array proteínas retêm sua estrutura dobrada e funcionam como se estivessem presentes em um ambiente aquoso.
- As proteínas se comportam como se estivessem em solução livre.
DINÂMICA COMPETITIVA E TECNOLOGIA USP
Consistência Excepcional
As matrizes de proteínas feitas com a tecnologia Aicone-Protein Array apresentam uma consistência excepcional, medida pelo coeficiente de variação percentual (CV%).
O gráfico mostra o CV% de réplicas intra-proteínas executadas em um array de proteínas baseado em Aicone-Protein Array (Immunome) comparado a um array de proteínas não Aicone-Protein Array (PX). O CV% médio para Immunome foi de 7,2% enquanto o CV% para a matriz protéica PX foi de 37%.
Muito Alta Especificidade
A dobradura correta das proteínas em matrizes proteicas Aicone-Protein Array garante que tanto os epitopos contínuos quanto os descontínuos sejam preservados, portanto, todos os locais de ligação de anticorpos estão disponíveis. Isto leva a que as matrizes Aicone-Protein Array tenham uma especificidade muito alta, e por extensão, uma alta relação sinal/ruído.
Altamente Reprodutível
As matrizes proteicas baseadas em Aicone-Protein Array utilizam múltiplos controles positivos e negativos para medir a reprodutibilidade dentro e entre estudos e lotes.
O gráfico mostra uma correlação quase perfeita de Pearson acima de 0,97 ao comparar os níveis de anticorpos automáticos em 6.524 pontos de dados de proteínas em dois lotes diferentes.
Sensibilidade Picomolar
Anticorpos automáticos em matrizes proteicas baseadas em Aicone-Protein Array podem ser detectados com sensibilidade muito alta, apenas 1 – 10 µl de soro é necessário. O limite de detecção está na faixa de 10 pg/ml, com uma faixa dinâmica linear de pelo menos 5 ordens de magnitude.